第117章 那啥?我有點事先走一步(求訂閱)
方子業先開吃,也就先吃完午飯。
吃完後就站起身,往垃樓梯口的垃圾桶裡,把飯盒一扔,用指紋打開了實驗室的門。
這會兒,洛聽竹不知道從哪個學科的實驗室請來的劉師兄正在刷著手機,屬於是實力高超的雲淡風輕,看到有人開門,他抬頭望來,與方子業抿嘴一笑,算是打了個招呼。
方子業不認識他,至少不是骨科的師兄,所以方子業也並未上前去說些什麽。
洛聽竹找人問問題,自然是沒毛病的。
這位師兄,勇敢而直接的主動,也沒什麽毛病。
隻要他沒有什麽壞心思,起什麽歪門邪道的鬼主意,方子業站不到任何的角度去乾涉些什麽,還是做好自己的事情。
自然,洛聽竹希望方子業可以小小的露一手,從她的角度,希望以後這位劉師兄不要來麻煩她,這一點,方子業也是不可能答應的,也不可能去主動挑釁,做好自己。
否則萬一遇到了鐵板,到時候把自己變成了小醜,豈不是貽笑大方?
默默地做好自己的事情,展現出來一定的能力。
要來骨科實驗室裡幫忙做實驗,實驗室裡是歡迎的,不過要說耀武揚威的話,那還是不至於的。
他就算是再能打,要是把袁威宏或者秦葛羅叫來,他也隻能灰溜溜回去。
自然,可能鄧勇教授在基礎實驗方麵的實操,可能不怎麽好,但是還有洪字禮副教授啊!
洪字禮副教授的科研底蘊,與手外科的劉煌龍教授,無法直接對比,但是在洪字禮副教授所在的專科領域,目前是學術巨擘級彆,比劉煌龍還要牛掰,隻是說專業能力沒那麽強而已,屬於是中南醫院外科學領域科研中的絕對頂牛。
就算鄧勇教授這樣的正高教授可以沒有學生,洪字禮副教授不能沒有碩士和博士研究生,這是鄧勇教授自己所說的原話。
方子業要用細胞操作台,洛聽竹也同樣要用。
而且,洛聽竹的細胞操作台,還是方子業給她預約的,時間隻是比方子業晚了十幾分鐘。
細胞操作室裡麵的操作台共有三個。
方子業全副武裝地走進去,把自己比洛聽竹更前預熱的培養基丶PBS緩衝液拿出,然後還有可加熱的試劑以及不可加熱的試劑,都一一用酒精消毒噴灑後,放進了操作台中。
等洛聽竹帶著劉師兄進來到實驗室裡的時候,方子業已經是開始操作了。
操作台內的酒精燈一點,排氣扇一開,把細胞操作台的玻璃往下一拿,方子業就開始對培養瓶裡麵的細胞進行胰酶消化。
胰酶消化,是很多操作都必須要經過的一步。
細胞在培養瓶內時,是貼壁而生,需要消化後,將細胞懸浮起來,如此才能夠離心將細胞與試劑分離,然後進行傳代丶分裝,轉移到培養皿以及培養板中,相當於是一個過程性的操作。
這一個操作,可以類比為你從你常住地出家門口這一步,不管你下樓吃飯丶下樓買水果,或者是做其他的事情,伱首先得從門口跨出去。
這一步,是很簡單的,沒有太多的操作性可言,主要的功勞,都是離心機的。
方子業抽去胰酶懸浮液,避免過度消化把細胞給弄死了。
因為貼壁生長的細胞,就相當於是在寢室裡熟睡的小學生,胰酶相對於給寢室裡扔一顆煙霧彈。
但煙霧彈隻是讓他們出寢室這個門,而不是把他們關在裡麵給熏死了。
然而,等到方子業把分離好的細胞群都完全懸浮起來,重新進行了配比之後。
方子業就趕緊先把懸浮的細胞進行一次計數處理。
細胞的計數操作,暫時不在細胞房裡,得去勻一點試劑,去跑一下流式細胞儀,把濃度確定好。
同一批樣品內的細胞濃度,可以等同。
就好比你喝一瓶飲料,第一口和最後一口,原理上應該是甜度或者味道是對等的。
可計數完後,方子業並未把樣品帶回,而是在那邊,就直接封閉丟進了生物垃圾袋裡。
但知道了濃度之後,方子業的操作就開始了。
稀釋樣品,其實原理很簡單,就是把1ml的樣品,加入99ml的水,然後就稀釋了一百倍,而如果是把1ml的樣品,加入到999ml的液體裡麵,就是稀釋了一千倍。
而在進行濃度梯度的實驗時,就需要重複操作這麽一次,一般每次是稀釋10倍數。
按照正常的操作,其實隻需要提前把液體量配好。9ml丶99ml丶999ml。
然後再加入1ml的細胞懸浮液進去,然後分彆配勻後,再抽取9ml+1ml中的1ml,轉移到99ml中即可。
最多就是換幾個移液槍頭的事情。
但今天的方子業,卻不是這麽操作的。
他是把移液器,調到了200uL後,再直接往下麵擠出來1ul丶10ul以及100ul的量,到培養皿中。
沒有調節刻度,也沒有更換移液器。
這種操作,絕對是袁見打的操作。
畢竟啊,這相當於是盲操了啊,你要在200ul的移液器下,非定量地擠出來1ul的液體量,這不是扯犢子麽?
可方子業還就是這麽做的。
自然,這些稍微細節性的問題,旁邊正在操作的劉師兄和洛聽竹二人,都沒看到,就看到方子業的移液器槍頭都沒有更換,就這麽如同小雞啄米一般地點點點,點點點。
點了有一陣後,方子業再把不同的樣品,都分彆再加了999丶990丶900ul等位基數的純粹培養基液體。
然後才再增加幾根試管,重新用最標準化的操作,繼續稀釋細胞濃度。
這一次,方子業是為了尋找最佳操作的細胞濃度數量級,最後選擇一個最合適的濃度進行試驗。
畢竟,目前方子業在做的這個miRNA與骨巨細胞瘤中的HK2的關係,是沒有其他人做過的,方子業參考了其他腫瘤細胞與HK2關係的最佳濃度,沒能夠得到最好的圖片,方子業就隻能是自己再去找了。
一切都是未知數,甚至連參數都是未知數,這就是一些基礎實驗的難度。
但耗費不貴,隻是費了時間而已……
方子業這麽操作了幾次後,就先把一個二十四孔的細胞培養板盒蓋上,然後送進了恒溫細胞培養箱裡。
方子業的下一步操作,則是處理另外一個骨巨細胞瘤細胞係的這種濃度梯度差。
因為有可能不同細胞係的最佳反應濃度,還是不一樣。這就好像是臨床上,同樣是骨巨細胞瘤,但因為分型不一樣,所以術前術後的新輔助化療方案也會有所不同。
都是摸索而來的。
方子業所做的這些實驗,想要對標發表的不是什麽普通期刊,至少是15分以上的高質量期刊,自然要做好最全丶最足的準備。
且,找到了數量級後,方子業還得尋找1-9這個最佳反應的前置參數,看看同樣的數量級下,是否有差異。
而一般走到了1-9最佳參數,再加上數量級的最優解後,就不必再找。
方子業操作的骨巨細胞瘤細胞係,包括GCT-0404丶GCT1丶GCTSC。(注解:這些細胞株純屬原創,請專業知情的書友勿與現實對應。)
方子業走之後,洛聽竹圍觀的劉師兄才若有所思地看向了洛聽竹,好奇問:「洛師妹,這個是你師兄還是你師弟啊?做實驗操作都是這麽虎的啊?」
「我看他剛剛好像是打算做標準曲線的操作,直接盲操啊?」
方子業的操作,在不懂的人眼裡,就不過是加點東西而已,但是在做細胞實驗的-->>